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美问必答 | 从新手到高手:气相色谱常见问题的应对技巧

2024-07-17
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气相色谱(GC)是一种高效的物理分离技术,其原理基于不同物质在载气流动的色谱柱中分离。气相色谱的优势使得它被频繁使用在质量研究中,成为现代药物分析中不可或缺的重要技术:

● 高分辨率: 能够精确地将复杂混合物中的各种化合物分离成单一组分。

● 超高灵敏度: 可检测样品中极微量的目标化合物,为痕量分析提供了有力工具。

● 快速分析: 通常只需几分钟到几十分钟即可完成检测,大大提高了分析效率。

● 高通量: 适用于批量样品处理,能在短时间内分析大量样品,满足研发的高效需求。

云讲堂邀请z6尊龙工艺部贺亚蒙,为大家呈现气相色谱在药物分析领域的独特优势和强大能力。并围绕大家在试验中的困惑,为您解答应对技巧。

气相色谱常见问题的应对技巧.webp

点击链接“https://www.kangtya.com/video/gas-chromatography.shtml回顾贺亚蒙老师的整场直播。

01 老化的程序怎么样合适?

贺亚蒙:当色谱柱老化时,推荐以下操作:首先,在低温条件下(例如40°C),用载气吹扫色谱柱15分钟,以去除残留的氧气。然后,以每分钟5到10°C的升温速率逐步升温至色谱柱能耐受的温度,该温度比色谱柱的最高使用温度低20°C。在达到目标温度后,保持30至40分钟以确保色谱柱的稳定性。建议重复此过程两到三次,以有效延长色谱柱的使用寿命。

02 基线监测的时候经常有小毛刺一般会是怎么回事啊?

贺亚蒙:首先需确认毛刺的方向:是正方向、负方向还是两者均有?若出现双向毛刺,可能与电气环境有关。若仅单向存在,可能源自气路、色谱柱或检测器中微量固体颗粒,都需要一步步排查。

03 检测时发现原来可以分开的峰,突然达不到分离了,请问这个时候怎么老化色谱柱?

贺亚蒙:首先需确认您使用的色谱柱是否具备良好的分离效果。如果您之前能够成功分离的色谱峰现在无法分开,需要先确认该色谱柱是不是柱效较好的色谱柱。如果是的话,可能是该色谱柱出现了问题。建议截取柱头的一部分,然后使用老化程序对其进行处理。

04 载气应该如何选择?

贺亚蒙:载气要求具备良好的化学稳定性和高纯度。常用的载气包括氢气、氦气、氩气和氮气。氢气具有相对分子质量小、热导系数大、黏度小等特点,是热导检测器常用的载气、氢火焰离子化检测器中必用的燃气,但氢气易燃、易爆,使用时要特别注意安全。

氦气相对分子量小、热导系数大、黏度小、使用时线速度大,与氢气相比,更安全,但成本高,常用于气一质联用分析。氩气相对分子量大、热导系数小,但由于成本高,因而应用较少。氮气相对分子质量较大、扩散系数小、柱效相对较高、安全、价格便宜,氢火焰离子化检测器常用氮气作为载气。

05 TCD检测器测水分的时候稀释剂会不会引入水分,如何避免?

贺亚蒙:稀释剂会引入水分,影响检测结果。可以使用无水的稀释剂或使用分子筛对稀释剂除水。

06 气相色谱柱选择时,色谱柱的内径怎么选择?

贺亚蒙:1. 如果需要较高的柱效,可使用0.18-0.25 mm内径的色谱柱。0.18 mm内径的色谱柱十分适用于泵容量较低的GC/MS系统。直径较小的色谱柱容量最小,并需要最高的柱头压。

2. 如果需要较大的样品容量,可使用0.32 mm内径的色谱柱。与0.25 mm内径的色谱柱相比,这种色谱柱通常对不分流进样或大体积(>2 µl)进样时较早流出的溶质有更佳的分离度。

3. 只有在仪器配备大口径直接进样器,且要求柱效较高时,才使用 0.45 mm内径的色谱柱。特别适用于高载气流速的情况,例如吹扫捕集、顶空进样器和阀进样应用。

4. 只有配备大口径直接进样器时,才使用 0.53 mm内径的色谱柱。特别适用于高载气流速的条件,例如吹扫捕集、顶空进样器。0.53 mm内径的色谱柱在恒定的膜厚情况下具有最高的样品容量。

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